NIBSC 22/132 流感血凝素抗體血清標(biāo)準(zhǔn)品的產(chǎn)品分析

品牌：英國(guó)NIBSC標(biāo)準(zhǔn)品

CRM code（貨號(hào)）：22/132

英文名稱(chēng)：Influenza anti-B/Phuket/3073/2013-like (B Yamagata lineage) HA serum

描述：流感血凝素抗體血清標(biāo)準(zhǔn)品

產(chǎn)品用途：

使用適當(dāng)?shù)腘IBSC抗原試劑制備流感抗血清試劑22/132，用于B/Phuket/3073/2013樣抗原的單次徑向擴(kuò)散測(cè)定。

使用B/Phuket/3073/2013樣病毒的純化HA在綿羊SH792、SH793、SH794、SH795、SH796和SH797中制備抗血清試劑。HA抗原通過(guò)用菠蘿蛋白酶處理從純化的病毒中提取，并通過(guò)在蔗糖梯度上沉淀純化（Brand，CN和Skehel，JJ，Nature，New Biology，1972，238145-147）。

生物材料原產(chǎn)國(guó)：英國(guó)。

綿羊SH792、SH793、SH794、SH795、SH796和SH797的免疫接種計(jì)劃如下：肌肉注射一劑約100微克的B/Phuket/3073/2013病毒HA和弗氏wan全佐劑（FCA），兩周后注射50微克的B/Puket/3073/2013，包括弗氏不wan全佐劑（FIA）。對(duì)于SH792、SH795和SH797，一周后再給予兩劑50微克劑量的B/Phuket/3073/2013 HA，包括FIA。對(duì)于SH793、SH794和SH796，一周后再給予三劑50微克劑量的B/Phuket/3073/2013 HA，包括FIA。初次免疫六周后，收集血清并加入 sodium azid（0.05%w/v）。

為了滅活口蹄疫病毒，抗血清通過(guò)維持pH 5.5（或更低）至少30分鐘進(jìn)行處理，然后恢復(fù)到原始pH值。

將從綿羊SH792、SH793、SH794、SH795、SH796和SH797獲得的抗血清合并，用含有 sodium azid（0.05%w/v）的PBS緩沖液稀釋1:5，并裝入2ml體積的小瓶中。

材料的使用：

對(duì)于1ml中含有20-50微克HA活性的抗原的測(cè)定，應(yīng)將約15-25ul的未稀釋試劑加入1ml瓊脂糖中。可能需要根據(jù)使用的B/Phuket/3073/2013類(lèi)抗原標(biāo)準(zhǔn)或當(dāng)?shù)貙?shí)驗(yàn)室條件改變抗血清濃度。抗血清試劑22/132應(yīng)按照Wood，JM，Schild，GC，Newman，RW和Seagroatt，VA描述的方法使用。生物標(biāo)準(zhǔn)化雜志，1977，5，2。

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